مقاله بررسی متابولیسم داروی نوسکاپین در سلولهای مجزای کبد موش- word

اختصاصی از هایدی مقاله بررسی متابولیسم داروی نوسکاپین در سلولهای مجزای کبد موش- word دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

مقاله بررسی متابولیسم داروی نوسکاپین در سلولهای مجزای کبد موش- با فرمت  word قابل ویرایش شامل 72 صفحه

مقدمه......................................................................................................................

1-1- اوپیوییدها.......................................................................................................

1-1-1- تاریخچه.....................................................................................................

1-1-2- آلکالوییدهای تریاک.....................................................................................

1-1-3- پپتیدهای اوپیویید درون زاد..........................................................................

1-1-4- آثار اوپیوییدها بر اعضای مختلف..................................................................

1-1-5- مصارف بالینی اوپیوییدها..............................................................................

1-2- متابولیسم........................................................................................................

1-2-1- تاریخچه.....................................................................................................

1-2-2- کلیات متابولیسم..........................................................................................

1-2-3- مکان های متابولیسم داروها..........................................................................

1-2-4- عوامل تعیین کننده سرعت تغییر شکل زیستی.................................................

1-2-5- تکنیک های تجربی بررسی متابولیسم............................................................

1-2-6- کاربرد و اهمیت بررسی متابولیسم.................................................................

1-3- جداسازی سلولهای کبد....................................................................................

1-4- روش های مطالعه شده برای شناسایی و اندازه گیری نوسکاپین و متابولیت هایش..

1-5- کلیاتی درباره کروماتوگرافی و HPLC..............................................................

1-5-1- تاریخچه.....................................................................................................

1-5-2- اساس کروماتوگرافی....................................................................................

1-5-3- فازهای متحرک و ساکن در کروماتوگرافی مایع..............................................

1-5-4- کروماتوگرافی مایع با کارآیی بالا..................................................................

1-5-5- اساس دستگاه HPLC..................................................................................

عنوان                                                                                           صفحه

   

1-6- نوسکاپین........................................................................................................

1-6-1- برخی اثرات نوسکاپین.................................................................................

1-6-2- فارماکوکینتیک نوسکاپین..............................................................................

1-6-3- مروری بر روند متابولیسم نوسکاپین..............................................................

بخش دوم: روشها و مواد

2-1- اهداف مطالعه..................................................................................................

2-2- دستگاه ها و وسایل ........................................................................................

2-3- مواد...............................................................................................................

2-4- تهیه بافرهای پرفیوژن.......................................................................................

2-4-1- محلول Stock بافر هنکس با غلظت 10 برابر.................................................

2-4-2- محلول Stock بافر کربس- هنزلیت با غلظت 2 برابر......................................

2-4-3- بافر هنکس یک...........................................................................................

2-4-4- بافر هنکس دو............................................................................................

2-4-5- بافر کربس آلبومین......................................................................................

2-4-6- بافر کربس- هپس.......................................................................................

2-5- تهیه محلول کلاژن و کوت کردن پلیت 6خانه.....................................................

2-6- محیط کشت...................................................................................................

2-6-1- مراحل تهیه محیط کشت: (1:1) DMEM, F12.................................................

2-7- سرم جنین گاو (FBS).....................................................................................

2-8- کیت استریل پرفیوژن.......................................................................................

2-9- تهیه هپاتوسیت های تازه..................................................................................

2-9-1- نگهداری سلولهای به دست آمده از کبد موش................................................

2-9-2- بررسی حیات سلولی و نحوه اثر دادن دارو روی سلولهای جدا شده از کبد موش............

2-9-3- تهیه نمونه برای انجام آنالیز...........................................................................

2-10- روش سنتز مکونین (6 و 7- دی متوکسی فتالید)..............................................

2-11- دلایل انتخاب HPLC

مقاله خصوصیات سلولهای بنیادی مغز استخوان

اختصاصی از هایدی مقاله خصوصیات سلولهای بنیادی مغز استخوان دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

لینک پرداخت و دانلود در "پایین مطلب"

 فرمت فایل: word (قابل ویرایش و آماده پرینت)

 تعداد صفحات:17

خصوصیات سلولهای بنیادی مغز استخوان

1. نسبت به داروها و سمها مقاوم هستند این بدین علت میباشد که این سلولها و بخصوص سلولهای بنیادی خونساز مغز استخوان دارای چندین نوعtransporter ATP binding cassete   میباشند که یک پمپی در غشا این سلولها میباشد که با مصرف انرژی داروها و سموم وارد شده به سلول را به بیرون میراند.
2. این سلولها نسبت به آپوپتوز خیلی مقاوم هستند
3. سیستم ترمیم DNA در انها فعال میباشد

مغز استخوان دارای 4 نوع سلول بنیادی میباشد که به شرح هر یک میپردازیم

1. Stromal or mesenchymal stem cell
2. Multiple adult progenitor cell
3. Hematopoetic stem cell
4. Side Population Stem cell(SP stem cell)

Hematopoetic stem cell:1

دو نوع سلول بنیادی خونساز در مغز استخوان وجود دارد

1. Long term hematopoetic stem cell

در تمام مدت زندگی جاندار تکثیر میابد

1. Short term hematopoetic stem

این نوع از سلول بنیادی به سلولها و پیشسازهای لنفویید و میلویید تمایز میابد Long-term HSCs  دارای مقدار بالایی از فعالیت تلومرازی میباشد.سلولهای بنیادی خونساز دارای مارکرهای  c-kit, CD34,  sca1 در سطح خود میباشند این سلولها مارکر marker( Lin) را دارا نمیباشند یا انرا به مقدار کمی بیان میکنند((Lin–/low برای مقاصد پزشکی و پیوند این سلولها سلولهای با مشخصات زیر بیشترین شانس را برای پیوند دارند CD34+ Thy1+ Lin–  .روش دیگر برای خالص سازی این سلولها رنگ امیزی با رنگهای فلوروسنت بر پایه خاصیت efflux این سلولها با رنگهای Rhodamin 123  Hochest 33342  میباشد .در ترکیب این دو نوع رنگ امیزی سلولهاییکه با ایندو رنگ نمیگیرند یا کم رنگ میگیرند Hoechest low Rho low

غنی از سلولهای بنیادی خونساز میباشند.

Bone marrow mesenchymal stem cell or stromal celL

 سلولهای بنیادی  استرومال مغز استخوان یا سلولهای بنیادی مزانشیمال

هنگامیکه مغز استخوان کشت داده شود سلولهای بنیادی  استرومال مغز استخوان به کف فلاسک چسبیده و سلولهای بنیادی خونساز شناور میمانند.سلولهای بنیادی استرومال مغز استخوان مارکرهای زیادی برای شناخته شدن دارند.که مهمترین انها به شرح زیر میباشد

cytokines (interleukin-1, 3, 4, 6, and 7) receptors for proteins in the extracellular matrix, (ICAM-1 and 2, VCAM-1, the alpha-1, 2, and 3 integrins, and the beta-1, 2, 3 and 4 integrins

در مورد این سلولهای بنیادی بیشتر باهم صحبت خواهیم کرد.من این سلولها را پادشاه سلولهای بنیادی میدانم.تفاوت دیگر سلولهای بنیادی خونساز و مغز استخوان نبودن دو مارکر CD45,CD14 در سطح سلولهای بنیادی استرومال میباشد.

Multiple adult progenirto cell

این سلولهای بنیادی نوعی از سلولهای استرومال میباشند پلاستسسیتی بیشتری نسبت به  سلول بنیادی استرومال دارند.اصولا اگر ما سلولهای استرومال مغز استخوان را در دانسیته سلولی پایین در فلاسک کشت دهیم این سلولها به سمت مالتیپل ادولت میروند.این سلولها هستند که قدرت تمایز به سلولهای مشتق شده از هز 3 نوع لایه زایای جنینی را دارا میباشند.این سلولها دارای مارکرهای زیر هستند

CD 34 neg and CD 35 neg CD 133 + VEGFR-2+ CD 44 low CD 117 neg VE cadherin HLA-1 HLA-DR

SP stem cell

استفاده از فلوسیتومتری با طول موج مضاعف بر پایه رنگ امیزی هوخست 33342 نوع دیگری از سلولهای بنیادی را در مغز استخوان به نام side population  یا SP مشخص میکند.این سلولها دارای مارکرهای زیر هستند

n    CD 45 + c-kit + SCA-1+

مارکرهای سلولهای بنیادی استرومال مغز استخوان انسان

با استفاده از FACS 

مارکرهای زیر در انها منفی میباشد.

 CD4, CD8, CD11b, CD13,

CD14, CD15, CD29, CD30, CD31, CD34, CD45, CD49e,

CD71, CD73, CD105, CD133 (AC133), CD146, CD166,

Oct-4, VEGF receptor-2 (KDR), HLA-DR, HLA-ABC,

and b2-microglobulin.

اما این مارکرها در انها مثبت میباشد ولی به مقدار کمی بیان میشوند

Oct-4

CD105

CD117

Other adult stem cell endothelial progenitor cell in bone marrow

در طول  رشد جنین  درست بعد از گاسترولاسیون  یک نوع از سلول بنیادی که نامیده میشود  و از mesoderm مشتق میشود وجود دارد که احتمالا پیشساز سلولهای خونی ویا اندوتلیال میباشد محققین یافتند که در مغز استخوان سلولهایی وجود دارد که شبیه hemangioblast  عمل میکنند و انها را endothelial stem cells نام گذاردند مارکرهای این نوع از سلولها CD34+ (a marker for HSCs و بیان

transcription factor GATA-2 میباشند

چرا  سلولهای بنیادی استرومال مغز استخوان توسط سیستم ایمنی پس زده نمیشود.

تاکنون در باره سلولهای بنیادی مغز استخوان زیاد صحبت کردیم و قبلا نیز ذکر کردیم که این سلولهای بنیادی توسط سیستم ایمنی حتی در پیوندهای آلوگراف پس زده نمیشوند.بنابراین از کاندیداهای خوب برای ترانسپلنت وسلول درمانی میباشند.من نیز این سلولهای بنیادی را پادشاه سلولهای بنیادی خوانده بودم البته نوعی از سلولهای بنیادی به نام MAPC لایق این نام میباشند.اخیرا گرایش به سلولهای بنیادی بالغین باعث توجه زیاد محققین به این نوع از سلولهای بنیادی شده است.دو مکانیسم در رد پیوند سلولهای بنیادی وجود دارد.مکانیزم مستقیم و مکانیزم غیر مستقیم مکانیزم مستقیم  شامل شناسایی سلولها به وسیله CD8+ or CD4+ T سلولهای میزبان از طریق MHC  کلاس 1  و MHC کلاس 2 مولکول روی سلولهای بنیادی میباشد.مکانیسم غیر مستقیم شناسایی این سلولها توسط APC یا سلولهای آنتیژن پرزنتینگ سلولها(antigen presenting cell) و ارایه آن به لنفوسیتها میباشد.سلولهای توموری با آنکه مال خود مریض میباشند سیستم ایمنی را تحریک میکنند ولی  مانند سلولهای مزانشیمال قادرند این سیستم را سرکوب کنند. Koc et al, نشان دادن که سلولهای بنیادی مزانشیمال مغز استخوان وقتی به مریضهای:

Hurler's syndrome or metachromatic leukodystrophy

ترانسپلنت شد هیچ نوع واکنش ایمنی دیده نشده است.آزمایشاتیکه برای اثبات رد نشدن سلولهای بنیادی مغز استخوان وجود دارد شامل کشت همرمان این سلولها با لنفوسیتها یا

 co-culture  mixed lymphocyte reactions (MLR) میباشد.

این آزمایشات نشان داد که این سلولهای بنیادی باعث تحریک لنفوسیتها نشده اند پس دارای خاصیت سرکوب سیستم ایمنی میباشند.شواهد نشان میدهد که این سلولهای بنیادی فاقد MHC کلاس 2 میباشند.

آزمایشات مختلف نشان داد که سلولهای بنیادی استرومال مغز استخوان دارای MHC CLASS 1 و فاقد MHC CLASS 2 میباشند.بیان MHC CLASS 1 این مزایا را برای سلولهای بنیادی استرومال دارا میباشد که توسط NK CELL ها شناسایی نمیشوند زیرا NK CELL سلولهای توموری که فاقد MHC کلاس 1 میباشند شناسایی و میکشد.HLA-G پروتیین شبیه MHC میباشد که که در محافظت جنین از رد شدن توسط NK CELL نقش دارد.این پروتیین به رسپتورهای سطح سلولهای خودی یعنی رسپتورهای KIR 1 و KIR2 موجود در سطح سلولها متصل شده  و از کشته شدن و شناسایی این سلولها توسط NK جلوگیری میکند.غیاب MHC CLASS2 در سطح سلولهای بنیادی استرومال مغز استخوان این قدرت را به این سلولها میدهد تا از شناسایی توسط CD4+T CELL در امان باشند.علاوه بر این این سلولهای بنیادی به نظر میرسد که رسپتورهای :

CD40, CD40L, CD80 or CD86 که برای شناسایی سلولها توسط

Effetctor T cell لازم میباشد را دارا نمیباشند.

ارتباط سلولهای بنیادی مزانشیمال در عملکرد و بلوغDentritic cell

Dendritic cells (DC)  از کارامدترین سلولهای APC میباشند.این سلولها به خوبی تمایز نیافتند تا پاسخ ایمنی را برانگیزند.سلولهای DC  نابالغ که دارای آنتیژن در سطح خود میباشند میتوانند باعث از کار انداختن Tcell شوند. Zhang et al شواهدی ارائه داد که سلولهای بنیادی مزانشیمال در فرایند بلوغ DC نقش دارند.کشت همزمان سلولهای بنیادی مغزاستخوان و DC این نکته را نشان داد که این سلولها از بیان شدن CD1a, CD40, CD80, CD86, and HLA-DR توسط DC در طی فرآیند بلوغ جلوگیری میکنند.پس این سلولهای بنیادی سلولهای DC را در یک مرحله نا بالغ قرار میدهند و APC را تبدبل به یک سلول ناکارامد در فرایند ایمونولوژیکی میکند.

تاثیر سلولهای بنیادی مزانشیمال بر Tcell CD4+

شواهدی نشان میدهد که این سلولهای بنیادی مستقیما با Tcell واکنش داده و سیستم ایمنی را سرکوب میکنند.شواهد نشان میدهد که این سلولهای بنیادی از ارتباط Tcell با APC جلوگیری میکنند.در فرآیند تمایز Tcell این نکته قابل گفتن است که این سلولها از ترشح IFN-ð توسط Th1 جلوگیری میکنند.سلولهای بنیادی مزانشیمال حتی در سیکل سلولیT cell تاثیر میگذارند بدبن صورت که از بیان شدن cyclin D2 توسط این سلولها جلوگیری کرده و باعث upregulation ژنcyclin dependent kinase inhibitor p27kip1 در لنفوسیتها میشود.بنابراین از تکثیر این سلولها جلوگیری میکند.

تاثیر سلولهای بنیادی مزانشیمال بر CD8+ Tcell   و NK cell

CD8+ آنتیژنها را با  آزاد کردن :

دانلود مقاله سلولهای بنیادی و کاربرد آنها

اختصاصی از هایدی دانلود مقاله سلولهای بنیادی و کاربرد آنها دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

لینک دانلود و خرید پایین توضیحات

فرمت فایل word  و قابل ویرایش و پرینت

تعداد صفحات: 83

سازمان آموزش وپرورش استان مرکزی

مدیریت آموزش وپرورش شهرستان خمین

دبیرستان شاهدان کوثر

عنوان :

سلول های بنیادی و کاربرد آن ها

استاد راهنما :

سرکار خانم مرشدی

محققین :

فاطمه اعظمی ؛ سیده فاطمه جباری ؛ شیما خدامرادی

بهار1387

تقدیم به:

پدران مهربان و مادران عزیزتر از جانمان که ما را در تهیه و تدوین این تحقیق یاری ومساعدت نموده اند.

سپاسگزاری

سپاس خداوندی را که سخنوران از ستودن او عاجزندو حسابگران ازشمارش نعمتهای او ناتوان، تلاشگران از ادای حق او درمانده اند. خدایی که افکار ژرف اندیش، ذات او را درک نمی کنند و دست غواصان دریای علوم به او نخواهند رسید، پروردگاری که برای صفات او حدومرزی وجود ندارد.

پس ازحمدوسپاس خداوندبزرگ، وظیفه خود می دانیم که خالصانه ترین تقدیروتشکرخودراتقدیم نمائیم به مربیان سرکار خانم ها : اسماعیلی، بهرامی، احمدی ومرشدی که سختی ها را تحمل کرده و ما در این تحقیق راهنمایی بوده اند.

از مسئولین پژوهش سرای دانش آموزی آقای حمزه لو و دیگر همکاران ایشان که در تهیه مطالب و استفاده از امکانات پژوهش سرا ما را یاری نموده اند قدر دانی می نمائیم.

در پایان برای عزیزانی که ما را یاری نموده اند، از خداوند متعال سعادت دنیوی و اخروی مسئلت داریم.

فهرست مطالب

موضوع صفحه

پیشگفتار 6

چکیده 7

فصل اول 9

مقدمه 10

فصل دوم 12

روش تحقیق 13

ادبیات و سوابق سلول های بنیادی 14

فصل سوم 17

تاریخچه 18

فصل چهارم 20

سلول های بنیادی چیست؟ 21

ـ سلول های بنیادی جنینی 22

بلاستوسیست چیست؟ 22

چگونگی کشت سلول های بنیادی جنینی 23

تست های آزمایشگاهی انجام شده به منظور تشخیص سلول های بنیادی جنینی 24

سلول های بنیادی جنینی قابلیت تبدیل به چه سلول هایی را دارند؟ 28

چرا سراغ استفاده از سلول های جنینی حیوانات رفته اند؟ 28

ـ سلول های بنیادی بزرگسالان 28

آزمایشات مورد استفاده به منظور شناخت سلول های بنیادی در بزرگسالان 32

ـ سلول های بنیادی بند ناف 33

مزایای استفاده از خون بند ناف 33

مقاله سلولهای بنیادی بند ناف وسلولهای بنیادی خارج رویانی

اختصاصی از هایدی مقاله سلولهای بنیادی بند ناف وسلولهای بنیادی خارج رویانی دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

لینک پرداخت و دانلود *پایین مطلب*

    فرمت فایل:Word (قابل ویرایش و آماده پرینت)

    تعدادصفحه:9

سلولهای بنیادی بند ناف وسلولهای بنیادی خارج رویانی

(extra embryonic stem cell)

قبل از اینکه در مورد سلولهای بنیادی بند ناف و خانواده آن صحبت کنم لازم است مختصری در مورد ساختمان جفت و بند ناف برایتان صحبت کنم جفت دارای دو قسمت است یک بخش جنینی که از کوریون کرکی یا کوریون پرزی و یک بخش مادری که از دسیدوای اصلی تشکیل شده است فضای بین صفحات کوریونی و دسیدوآیی با دریاچه های پرزی خون مادری  پر شده است.شاخه های پرزی بافت جنینی به داخل دریاچه های خون مادری رشد نموده و در آنها شناور میباشند.گردش خون جنینی در تمام موارد از گردش خون مادر توسط یک پرده سنسیتیالی مشتق از کوریون و سلولهای آندوتلیال از مویرگ جنینی جدا میباشد از اینرو جفت انسان از نوع هموکوریال میباشد دریاچه های بین پرزی جفتها کاملا رشد کرده و محتوی تخمینا 150 سانتیمتر مکعب خون مادری میباشند که در هر 3 یا 4 بار تجدید میشوند مساحت پرزها از 4 تا 14 متر مربع متغیر است و ازاینرو تبادلات بین مادر ونوزاد رآ سان مینماید .آمنیون کیسه بزرگی است که حاوی مایع آمنیونی بوده و جنین در آن توسط بند ناف خود آویزان میباشد. مایع ضربات را به خود میگیرد و اجازه حرکت به جنین میدهد. و مانع چسبیدن رویان به بافتهای اطراف میشود جنین مایع آمنیونی را میبلعد که از طریق روده جذب میشود و توسط جفت تصفیه میگردد.جنین ادرارش را به مایع آمنیونی میریزد بند ناف توسط آمنیون احاطه شده و حاوی دو سرخرگ نافی و یک ورید نافی که توسط ژله وارتون احاطه شده اند میباشد.

مقاله در مورد سلولهای بنیادی بند ناف و سلولهای بنیادی خارج رویانی

اختصاصی از هایدی مقاله در مورد سلولهای بنیادی بند ناف و سلولهای بنیادی خارج رویانی دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

مقاله کامل بعد از پرداخت وجه

لینک پرداخت و دانلود در "پایین مطلب"

فرمت فایل: word (قابل ویرایش و آماده پرینت)

تعداد صفحات: 9

قبل از اینکه در مورد سلولهای بنیادی بند ناف و خانواده آن صحبت کنم لازم است مختصری در مورد ساختمان جفت و بند ناف برایتان صحبت کنم جفت دارای دو قسمت است یک بخش جنینی که از کوریون کرکی یا کوریون پرزی و یک بخش مادری که از دسیدوای اصلی تشکیل شده است فضای بین صفحات کوریونی و دسیدوآیی با دریاچه های پرزی خون مادری  پر شده است.شاخه های پرزی بافت جنینی به داخل دریاچه های خون مادری رشد نموده و در آنها شناور میباشند.گردش خون جنینی در تمام موارد از گردش خون مادر توسط یک پرده سنسیتیالی مشتق از کوریون و سلولهای آندوتلیال از مویرگ جنینی جدا میباشد از اینرو جفت انسان از نوع هموکوریال میباشد دریاچه های بین پرزی جفتها کاملا رشد کرده و محتوی تخمینا 150 سانتیمتر مکعب خون مادری میباشند که در هر 3 یا 4 بار تجدید میشوند مساحت پرزها از 4 تا 14 متر مربع متغیر است و ازاینرو تبادلات بین مادر ونوزاد رآ سان مینماید .آمنیون کیسه بزرگی است که حاوی مایع آمنیونی بوده و جنین در آن توسط بند ناف خود آویزان میباشد. مایع ضربات را به خود میگیرد و اجازه حرکت به جنین میدهد. و مانع چسبیدن رویان به بافتهای اطراف میشود جنین مایع آمنیونی را میبلعد که از طریق روده جذب میشود و توسط جفت تصفیه میگردد.جنین ادرارش را به مایع آمنیونی میریزد بند ناف توسط آمنیون احاطه شده و حاوی دو سرخرگ نافی و یک ورید نافی که توسط ژله وارتون احاطه شده اند میباشد.

سلولهای بنیادی خارج رویانی شامل Amniotic Epithelial Cells یا سلولهای بنیادی لایه اپیتلیال پرده آمنیون و سلولها بنیادی جفت و  سلولهای بنیادی مایع امنیونی و سلولهای بنیادی خود ساقه اصلی  بند ناف که شامل 3 نوع سلول میباشد. این 3 نوع سلول شامل سلول بنیادی خون بند ناف سلولهای بنیادی لایه ساب اندوتلیال ورید بند ناف و سلولهای بنیادی ماتریکس بند ناف میباشند. در مورد این سلولهای بنیادی بیشتر باهم صحبت خواهیم کرد .به طور خلاصه این سلولها شامل:

1. Umbilical cord blood stem cell
2. Umbilical cord vein stem cell
3. Umbilical cord matrix stem cell
4. Umblical cord placenta stem cell
5. Amonion fluid stem cell
6. Amniotic Epithelial Cells