هایدی

مرجع دانلود فایل ,تحقیق , پروژه , پایان نامه , فایل فلش گوشی

هایدی

مرجع دانلود فایل ,تحقیق , پروژه , پایان نامه , فایل فلش گوشی

دانلود مقاله کامل درباره ساخت محلول های مختلف

اختصاصی از هایدی دانلود مقاله کامل درباره ساخت محلول های مختلف دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

دانلود مقاله کامل درباره ساخت محلول های مختلف


دانلود مقاله کامل درباره ساخت محلول های مختلف

 

 

 

 

 

 

لینک پرداخت و دانلود *پایین مطلب*

فرمت فایل: Word (قابل ویرایش و آماده پرینت)

تعداد صفحه :47

 

بخشی از متن مقاله

ساخت محلول ها :

1- محلولهای بافری:

  • محلول بافر A :

این محلول ، بافر تریس بازی با غلظت mM 50 ،‌8/5=PH می باشد که از محلول استوک آن ،‌با غلظت mM200 به طریقة زیر تهیه شد:

مقدار g22/24 تریس بازی وزن شد و با ml800 آب مقطر در یک بشر یک لیتری مخلوط شد. PH این محلول با استفاده از محلول Hcl ،‌37% تا 8/5= pH پائین آورده شد. سپس حجم نهایی توسط آب مقطر به یک لیتر رسانده شد. محلول استوک بدست آمده ، 4 بار رقیق شد تا محلول بافر A حاصل شد.

2-1- محلول بافر B:

این محلول ، بافر تریس بازی با غلظت mM50 ،‌8/6PH= می باشد که همانند محلول بافر A تهیه شد با این تفاوت که کاهش pH محلول تا 8/6=pH  صورت گرفت.

3-1- محلول بافر C:

این محلول ، بافر فسفات سدیم با غلظت mM10،8/6= pH است که از محلول استوک آن با غلظت mM 100به طریقه زیر تهیه گردید:

مقدار g81/35 نمک فسفات دی سدیک و g6/15 نمک فسفات مونوسدیک به همراه ml800 آب مقطر در یک بشر یک لیتری مخلوط شد. سپس pH محلول توسط محلول Hcl، 37% تا 8/6= pH پائین آورده شد و با آب مقطر حجم نهایی محلول به یک لیتر رسانده شد. محلول استوک بدست آمده ، 10 بار رقیق شد تا محلول بافر c بدست آمد.

2- محلولهای االکتروفورز:

1-2- محلول بافر تانک یا الکترود:

این محلول شامل تریس بازی با غلظت M025/0 و گلایسین با غلظت M192/0 ، با 3/8= pH در آزمایشات الکتروفورز بکار گرفته شد. این محلول به حجم یک لیتر به صورت زیر تهیه شد:

مقدار g03/3 تریس بازی و g4/14 گلایسین وزن شده و در یک بشر یک لیتری تا حجم یک لیتر ، آب مقطر به آنها اضافه گردید.

2-2-محلول بافر ژل متراکم کننده (ژل فوقانی):

این محلول با غلظت M5/0 تریس بازی ، 8/6 = pH به طریقة زیر تهیه شد:

مقدار g 1/6 تریس بازی به همراه ml70 آب مقطر در یک بشر مخلوط شد و با کمک محلول Hcl37%، pH  آن تا 8/6 کاسته گردید. سپس حجم نهایی محلول با آب مقطر به ml100 رسانده شد.

3-2- محلول بافر ژل جدا کننده (ژل تحتانی):

این محلول با غلظت M5/1 تریس بازی ، 8/8 = pH به طریقة زیر تهیه شد:

مقدار g 2/18 تریس بازی در ml70آب مقطر به حالت محلول درآورده شد و توسط محلول Hcl37% pH آن تا  8/8 کاهش پیدا کرد. سپس حجم نهایی محلول با آب مقطر به  ml 100 رسانده شد.

4-2- محلول بافر نمونه (× 5):

حجم ml15 محلول بافر تریس بازی با غلظت 1M، 8/6= pH (g81/1 تریس بازی در ml15 آب مقطر) تهیه شد. به این محلول ml25گلیسرول ، و ml10 آب مقطر افزوده گردید و بخوبی مخلوط شد. به محلول حاصل چند بلور رنگ برموفنل بلو اضافه شد تا محلول به رنگ آبی تیره درآمد.

5-2- محلول آکریل آمید بیس آکریل آمید:

پودر آکریل آمید و بیس آکریل آمید سمی بوده و باید از استنشاق آنها جلوگیری کرد. جهت تهیه محلول استوک 8/30% از آن با استفاده از دستکش و ماسک ، در زیر هود شیمیایی ،‌مقدار g30 پودر آکریل آمید و g8/0 پودر بیس آکریل آمید وزن شد و در یک بشر تا حجم ml100 آب مقطر مخلوط گردید. برای حل شدن بهتر مواد فوق در آب مقطر ، بشر در حمام آب گرم قرار داده شد و به کمک همزن مغناطیسی به مدت 30 دقیقه مخلوط شد. سپس محلول بدست آمده توسط کاغذ صافی فیلتر شد و در ظرف تیره رنگی در یخچال نگهداری گردید. محلول فوق خطرناک و نورو توکسیک می باشد و در طی کار آبا آن باید از دستکش استفاده کرد.

6-2- محلول آمونیوم پرسولفات (APS):

جهت تهیة محلول 10 درصد APS، مقدار g1/0 پودر آمونیوم پرسولفات وزن شده و در 1ml آب مقطر حل گردید. این محلول بهتر است تازه تهیه شده و در یخچال نگهداری شود.

3- محلولهای رنگامیزی ژل پلی آکریل آمید:

1-3- محلول رنگامیزی کوماسی بلو G-250:

حجم ml50 محلول رنگامیزی با مخلوط کردن اجزاء زیر تهیه گردید:

ml15 متانل و ml10 اسید استیک گلاسیال با ml25آب مقطر مخلوط شد. به محلول حاصل مقدار g2/0-1/0 رنگ کوماسی بلو G-250 اضافه گردید تا محلول آبی تیره رنگی بدست آمد. این محلول بعنوان محلول ثبوت پروتئینها نیز عمل می کند.

1-1-3- محلول رنگبر:

برای زدودن رنگ از ژل ، به حجم بیشتری محلول رنگبر نسبت به محلول رنگامیزی نیاز است . حجم ml100از این محلول برای رنگبری یک ژل کوچک با ضخامت mm75/0 کافی می باشد. برای تهیة آن ml30 متانل و ml20 اسید استیک با ml50 آب مقطر مخلوط شد و در ظرف درب بسته ای نگهداری گردید.

2-3- محلولهای رنگامیزی نقره :

این محلولها شامل چهارمحلول ، به ترتیب جهت رنگامیزی بکار برده شدند. هر یک از محلولهای رنگامیزی به حجم ml60 تهیه شد که جهت رنگامیزی یک ژل کوچک با ضخامت mm75/0 کافی می باشد. تمامی محلولها برای هر بار رنگامیزی ، تازه تهیه شده و پس از استفاده دور ریخته شدند.

1-2-3- معرف ثبوت:

حجم ml60 محلول استوک استن 50% (V/V) (ml30 استن در ml30 آب مقطر) با حجم ml5/1 محلول استوک تری کلرواستیک اسید (TCA) 50% (V/V) (ml 75/0TCA در ml75/0 آب مقطر ) مخلوط شد. سپس 25 میکرولیتر محلول فرمالدتید 37% اضافه شد.

2-2-3- محلول پیش تیمار II :

حجم 100 میکرولیتر محلول استوک تیوسولفات سدیم 10% (W/V) (g 1/0 تیوسولفات سدیم خشک در 1ml  آب مقطر ) با ml60 آب مقطر مخلوط گشت.


3-2-3- معرف رنگ:

حجم ml8/0 محلول استوک نیترات نقره 20% (W/V)  (g2/0نیترات نقره خشک در ml1 آب مقطره ) و حجم ml6/0 محلول فرمالدئید 37% به ml60 آب مقطر اضافه شده و مخلوط گردید.

4-2-3- معرف ظهور

مقدار g2/1 کربنات سدیم وزن شده و در ml60 آب مقطر حل شد. سپس 25 میکرولیتر محلول فرمالائید 37% و 25 میکرولیتر محلول استوک تیوسولفات سدیم 10% (W/V)  (g1/0 تیوسولفات سدیم خشک در ml1 آب مقطر) به محلول فوق اضافه و مخلوط گشت.

4- معرف برادفورد:

جهت تهیه این معرف که به منظور سنجش مقدار پروتئین محلول بکار برده شد، به طریقة زیر عمل گردید:

مقدار mg100 رنگ کوماسی بلو G-250 وزن شده و در ml50 اتانل 95%  حل شد. به محلول حاصل ، ml100 ارتوفسفریک اسید 85% اضافه گردید. سپس حجم نهایی محلول با افزودن آب مقطر به یک لیتر رسانده شد. محلول بدست آمده با استفاده از کاغذ صافی فیلتر شده و در ظرف درب داری نگهداری شد.

 

آماده سازیها:

  • آماده سازی ژل سفادکس G-50:

مقدار g20 ژل سفادکس G-50 خشک وزن شده و در یک ارلن نیم لیتری با ml300 محلول بافر Bمخلوط شد. سپس این مخلوط به مدت 5 ساعت در حمام آب گرم) (90°c قرار داده شد تا ذرات ژل کاملاً متورم شدند. در این مرحله ، ژل گرم ، در دو نوبت 5 دقیقه ای ، به کمک دستگاه پمپ خلاء ،‌دگازشد تا تمامی حبابهای هوا از داخل ژل خارج گردید.

  • آماده سازی ژل سفادکس G-200:

مقدار g10 ژل سفادکس G-200  به همراه ml200 محلول بافر C  در یک ارلن نیم لیتری با ml 300محلول بافر B مخلوط شد. و همانند روش قبل به مدت 5 ساعت در حمام آب گرم) (90°c  قرار داده شد سپس ژل گرم در سه نوبت 5 دقیقه ای ، توسط دستگاه پمپ خلاء ، دگاز شد تا تمامی حبابهای هوای موجود در ژل تخلیه گردید.

  • آماده سازی ژل تعویض یون DE52:

این ژل بصورت مرطوب موجود بوده و جهت آماده سازی نیازی به حرارت ندارد. متناسب با حجم ستون مورد نظر ،‌مقداری از ژل مرطوب DE52  در یک بشر با گنجایش ml250ریخته شد و با ml200 بافر B مخلوط گردید. سپس ظرف حاوی ژل به مدت یک شبانه روز ، با یک بار تعویض بافر ،‌در دمای اتاق قرار داده شد تا ژل با محلول بافر به تعادل رسید.

  • آماده سازی کیسه دیالیز:

کیسه دیالیز خشک با انجام مراحل زیر برای مصرف آماده شد:

کیسه دیالیز در ml200 محلول کربنات سدیم 5% (W/V)  g)5 کربنات سدیم در ml100آب مقطر ) دو مرتبه و هر بار به مدت 15 دقیقه جوشانده شد. سپس کیسه کاملاً با آب مقطر شستشو داده شد تا از کربنات سدیم پاک شد. در مرحله بعد کیسه در ml200محلول EDTA با غلظت mM5 g)37/0 در ml200آب مقطر) به مدت 15 دقیقه جوشانده شد. سپس داخل و خارج کیسه با آب مقطر شستشو داده شد. کیسه دیالیز آماده شده در محلول اتانل 70% به مدت طولانی نگهداری شد.

  • محلولهای سوبسترا:

1-5- محلول متیل کتکول:

این محلول با غلظت M5-10×5 به طریقه زیر تهیه شد:

مقدار mg2 از رنگ متیل کتکول با ترازوی حساس وزن شد و به یک بشر کوچک منتقل گردید . حجم ml4 الکل ایزوپروپانل به مادة فوق اضافه شد و به خوبی مخلوط گشت . این محلول به آرامی تا دمای جوش محلول حرارت داده شد و به محض رسیدن به این دما حرارت قطع گردید. پس از اطمینان از اینکه مادة‌فوق کاملاً در الکل حل شده است ،‌با استفاده از ایزوپروپانل حجم نهایی محلول به ml5 رسانده شد. این محلول در تاریکی بمدت یک هفته قابل نگهداری می باشد.

2-5- محلول متیل فنل:

این محلول با غلظت 5-10×5 مشابه طریقة فوق تهیه شد:

مقدار mg2 از رنگ متیل فنل در یک بشر کوچک با ml4 ایزوپروپانل مخلوط شده و تا رسیدن به دمای جوش محلول حرارت داده شد. سپس با افزودن ایزوپروپانل ،‌حجم نهایی محلول به ml5 رسانده شد.

*** متن کامل را می توانید بعد از پرداخت آنلاین ، آنی دانلود نمائید، چون فقط تکه هایی از متن به صورت نمونه در این صفحه درج شده است ***


دانلود با لینک مستقیم


دانلود مقاله کامل درباره ساخت محلول های مختلف

پاورپوینت درباره دیالیز و محلول های همو دیالی

اختصاصی از هایدی پاورپوینت درباره دیالیز و محلول های همو دیالی دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

پاورپوینت درباره دیالیز و محلول های همو دیالی


پاورپوینت درباره دیالیز و محلول های همو دیالی

فرمت فایل : power point  (لینک دانلود پایین صفحه) تعداد اسلایدها 15 اسلاید

 

 

 

 

 

 

 

محلول دیالیز

هر بیمار در هر نوبت دیالیز خود حداقل به 120تا 180 لیتر آب نیاز دار د که این آب قبل از قرار گرفتن در کنار خون بیمار وعبور از صافی ، با یک بافر الکترولیتی که از نظر وجود املاح نزدیک به ترکیبات الکترولیتی خون باشد ترکیب گردد .

برای این منظور از محلول ها و یا ترکیبات خشک کنستانتره به دو فرم ذیل استفاده میشود :

1- بافر استات

2-بافر بیکربنات سدیم

 

میزان پتاسیم مایع دیالیز

 

این میزان بین 5/4- 2 میلی اکی والان در لیتر می باشد .

در ایران مایع دیالیز اسیدی (دیالیز بیکربنات )حاوی 2 میلی اکی

و الان در لیتر پتاسیم می باشد .مایع دیالیز استات به دو صورت

پتاسیم  IوII وجود دارد که حاوی یک میلی اکی و الان و دو میلی

اکی و الان در لیتر پتاسیم است .

با توجه به اینکه محلول با غلظت 3 میلی اکی و الان در لیتر پتا سیم

 در ایران موجود نیست می توان با اضافه کردن 5/17 سی سی پتاسیم به

هر لیتر مایع دیالیز غلیظ یک میلی اکی و الان در لیتر پتاسیم مایع را بالا

برد.


دانلود با لینک مستقیم


پاورپوینت درباره دیالیز و محلول های همو دیالی

دانلود مقاله کنسرو نخود سبز در محلول نمک

اختصاصی از هایدی دانلود مقاله کنسرو نخود سبز در محلول نمک دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

دانلود مقاله کنسرو نخود سبز در محلول نمک


دانلود مقاله کنسرو نخود سبز در محلول نمک

 

مشخصات این فایل
عنوان: کنسرو نخود سبز در محلول نمک
فرمت فایل: word( قابل ویرایش)
تعداد صفحات : 9

این مقاله در مورد کنسرو نخود سبز در محلول نمک می باشد .

 

بخشی از تیترها به همراه مختصری از توضیحات هر تیتر از مقاله کنسرو نخود سبز در محلول نمک

خارج کردن دانه ها از پیله
 پس از برداشت محصول برای خارج کردن دانه ها از پیله از دستگاه Viner استفاده می شود . دستگاه دارای یک استوانه خارجی و یک استوانه مشبک داخلی است که برای خروج نخود سبز طراحی 0شده و پره های داخلی که به غلاف ضربه می زنند و دانه ها را آزاد می کنند می باشد ، پس از خارج شدن دانه ها از پیله لازم است هرچه سریعتر و در 0کمتر از 4 ساعت مراحل بعدی 0فرآیند صورت پذیرد ، در غیر اینصورت از کیفیت کاسته خواهد شد . زیرا از .......(ادامه دارد)

تمیز کردن و درجه بندی دانه ها
نخود سبزهای خارج شده از پیله را برای حذف ناخالصیها ابتدا نوار نقاله ریخته مورد بازرسی قرار می دهند و از آنجا به سرند باقی مانده و دانه های طبیعی عبور می نمایند . دانه های عبور کرده در معرض هوا با فشار زیاد قرار گرفته و قسمت دیگری از مواد ناخالصی آنها حذف می شود ، پس از این مرحله دانه وارد تانکهای ویژه و از جنس استیل شده ، آب و مقداری خمیر صابون ویژه به آنها افزوده می شود و نحوه موثرتری تمیز می شوند . پس از این مرحله قسمت مایع جدا شده و دانه .......(ادامه دارد)

کدر شدن آب نمک قوطی
 براین قوطی کنسرو نخود سبز در طی نگهداری پس از فرآیند ممکن است کدر شود . علل کدر شدن براین در این حالت عبارت است از :
الف – رسیدگی بیش از حد لازم دانه که در اثر آن مقدار نشاسته زیاد شده و مقداری از آن وارد براین می شود و در طی نگهداری بعدی منعقد شده و رسوب سفید رنگی از آن حاصل می شود .
ب – شکسته شدن دانه ها و پارگی پوسته دانه ها در .....(ادامه دارد)

کنترل کیفی
درکنترل کیفی آزمونهای زیر بایستی انجام گیرد :

الف – روی ماده اولیه
•    درجه بندی دانه ها که 90 % آنها باید دارای اندازه کم وبیش یکسان باشند .
•    اندازه گیری ضایعات و ناخالصی شامل دانه های آفت زده ، مواد خارجی ، باقیمانده های گیاهی ، دانه های ناخالص ، شکسته شده ، له شده که مقدارشان باید کمتر از 5 % باشد .
•    آزمون فلوتاسیون برای اندازه گیری میزان رسیدگی دانه ها که در آن 50 دانه نخود سبز به دو دسته......(ادامه دارد)

فهرست مطالب مقاله کنسرو نخود سبز در محلول نمک

خارج کردن دانه ها از پیله
تمیز کردن و درجه بندی دانه ها
بلانچینگ
پر کردن در بسته
دربندی قوطیهای پر شده
فرآیند دمایی
کنترل کیفی
تغییرات رنگ محصول
ویژگیهای کلی محتوی قوطی کنسرو نخود سبز


دانلود با لینک مستقیم


دانلود مقاله کنسرو نخود سبز در محلول نمک

مقاله اثر غلظت های گوناگون منیزیم سولفات بر مقدار قندهای محلول و نامحلول قرنفل در شرایط کشت بافت

اختصاصی از هایدی مقاله اثر غلظت های گوناگون منیزیم سولفات بر مقدار قندهای محلول و نامحلول قرنفل در شرایط کشت بافت دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

مقاله اثر غلظت های گوناگون منیزیم سولفات بر مقدار قندهای محلول و نامحلول قرنفل در شرایط کشت بافت


مقاله اثر غلظت های گوناگون منیزیم سولفات بر مقدار قندهای محلول و نامحلول قرنفل در شرایط کشت بافت

فرمت فایل : word (قابل ویرایش) تعداد صفحات : 12 صفحه

 

 

 

 

 

 

 

 

چکیده

 گیاهانی که به عنوان نباتات زینتی مورد توجه تولید کنندگان و پرورش دهندگان قرار می گیرند متعلق به دو گروه کاملاً مشخص هستند که یا گل های زیبا دارند و یا برگ های زیبایی دارند. استفاده از شیوه های نوین ازدیاد گیاهان مانند کشت بافت سبب کوتاه شدن چرخه های تکثیر گیاهان از جمله گیاهان زینتی شده است. با استفاده از تکنیک کشت بافت می توان شرایط بهینه رشد گیاهان را فراهم کرد. در پژوهش کنونی گیاه قرنفل( .Dianthus barbatus L) تحت تیمارهای مختلف منیزیم سولفات (MgSO4.7H2O) شامل 0، 5/0 ، 5/1 و 2 برابر MS یا همان محیط کشت معروف Murashige و Skoog  قرار گرفت. بذرها با استفاده از هیپوکلریت سدیم 1% به مدت 10 دقیقه ضدعفونی سطحی شده و در محیط MS قرار گرفتند. جداکشت ها به صورت قطعات 2 گرهی از  گیاهان رشد یافته در محیط کشت MS تهیه شده و در محیط های تیماری مختلف  قرار گرفتند. مدت تیمار دهی 30 روز بود و گیاهان در قالب طرح تصادفی با 5 تکرار مورد بررسی قرار گرفتند. نتایج نشان داد که میزان قند­های محلول و نامحلول در تیمارهای مختلف  MgSO4.7H2O در سطح 01/0 معنی دار است.

 

مقدمه:

  قرنفل با نام علمی .Dianthus barbatus L گیاهی علفی، دو یا چند ساله از خانواده میخک (Caryophyllaceae) می باشد (مظفریان1375). قرنفل گیاهی زینتی با رنگ گل های بسیار متنوع است که به دلیل زیادی تعداد گل ها روی هر بوته، حاشیه گلکاری شده با آن بسیار زیباست(خلیقی، 1374). از گل های بریده آن برای تهیه دسته گل استفاده می شود (وزیری، 1366).

اثرات غلیظ و رقیق شدن ماده‌ی معدنی در گیاهان، پدیده‌ای عمومی است که می‌بایست به آن توجه کرد و در حیطه‌ی آنتاگونیسم و یا سینرژیسم یونها طی جذب تفسیر گردد. برای مثال اگر غلظت دو ماده‌ی غذایی معدنی در محدوده‌ی کمبود باشد و تنها یکی از آنها در حد کافی تامین گردد. تشدید رشد، باعث رقیق شدن (Dilution) ماده‌ی معدنی دیگر شده و بدون هر گونه رقابت در جذب یا در گیاه باعث القا کمبود شدید می‌شود. دیدگاه اصلی در تشخیص نیازهای معدنی گیاه به منظور تجزیه‌وتحلیل روند تغذیه‌ی معدنی گیاه، دست‌یابی به سطح کمبود و مسمومیت هر یک از عناصر در بافت‌های گیاهی است


دانلود با لینک مستقیم


مقاله اثر غلظت های گوناگون منیزیم سولفات بر مقدار قندهای محلول و نامحلول قرنفل در شرایط کشت بافت

دانلود مقاله ساخت محلول ها

اختصاصی از هایدی دانلود مقاله ساخت محلول ها دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

دانلود مقاله ساخت محلول ها


دانلود مقاله ساخت محلول ها

 

مشخصات این فایل
عنوان: ساخت محلول ها
فرمت فایل : word( قابل ویرایش)
تعداد صفحات : 47

این مقاله درمورد ساخت محلول ها می باشد .

بخشی از تیترها به همراه مختصری از توضیحات هر تیتر از مقاله ساخت محلول ها

- محلولهای رنگامیزی ژل پلی آکریل آمید:
1-3- محلول رنگامیزی کوماسی بلو G-250:
حجم ml50 محلول رنگامیزی با مخلوط کردن اجزاء زیر تهیه گردید:
ml15 متانل و ml10 اسید استیک گلاسیال با ml25آب مقطر مخلوط شد. به محلول حاصل مقدار g2/0-1/0 رنگ کوماسی بلو G-250 اضافه گردید تا محلول آبی تیره رنگی بدست آمد. این محلول بعنوان محلول ثبوت پروتئینها نیز عمل می کند.
1-1-3- محلول رنگبر:
برای زدودن رنگ از ژل ، به حجم بیشتری محلول رنگبر نسبت به محلول رنگامیزی نیاز است . حجم ml100از این محلول برای رنگبری یک ژل کوچک با ضخامت mm75/0 کافی می باشد. برای تهیة آن ml30 متانل و ml20 اسید استیک با ml50 آب مقطر مخلوط شد و در ظرف درب بسته ای نگهداری گردید.
2-3- محلولهای رنگامیزی نقره :
این محلولها شامل چهارمحلول ، به ترتیب جهت رنگامیزی بکار برده شدند. هر یک از محلولهای رنگامیزی به حجم ml60 تهیه شد که جهت رنگامیزی یک ژل کوچک با ضخامت mm75/0 کافی می باشد. تمامی محلولها برای هر بار رنگامیزی ، تازه تهیه شده و پس از استفاده دور ریخته شدند.
1-2-3- معرف ثبوت:
حجم ml60 محلول استوک استن 50% (V/V) (ml30 استن در ml30 آب مقطر) با حجم ml5/1 محلول استوک تری کلرواستیک اسید (TCA) 50% (V/V) (ml 75/0TCA در ml75/0 آب مقطر ) مخلوط شد. سپس 25 میکرولیتر محلول فرمالدتید 37% اضافه شد.
2-2-3- محلول پیش تیمار II :
حجم 100 میکرولیتر محلول استوک تیوسولفات سدیم 10% (W/V) (g 1/0 تیوسولفات سدیم خشک در 1ml  آب مقطر ) با ml60 آب مقطر مخلوط گشت.
 
3-2-3- معرف رنگ:
حجم ml8/0 محلول استوک نیترات نقره 20% (W/V)  (g2/0نیترات نقره خشک در ml1 آب مقطره ) و حجم ml6/0 محلول فرمالدئید 37% به ml60 آب مقطر اضافه شده و مخلوط گردید.
4-2-3- معرف ظهور
مقدار g2/1 کربنات سدیم وزن شده و در ml60 آب مقطر حل شد. سپس 25 میکرولیتر محلول فرمالائید 37% و 25 میکرولیتر محلول استوک تیوسولفات سدیم 10% (W/V)  (g1/0 تیوسولفات سدیم خشک در ml1 آب مقطر) به محلول فوق اضافه و مخلوط گشت. .....(ادامه دارد)

روش کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون سفادکس G-200:
1-7-4- پر کردن ستون ژل فیلتراسیون سفادکس G-200:
ستون شیشه ای به ابعاد cm6/1×100 با استفاده از پایه و گیره به حالت عمودی قرار گرفت. این ستون دارای فیلتر در انتهای تحتانی خود بوده و نیازی به پشم شیشه ندارد. لوله متصل به انتهای ستون ،‌بسته شده و با کمک یک میلة شیشه ای ،‌ابتدا به ارتفاع cm20 بافر C و بلافاصله ژل سفادکس G-200 آماده شده ،‌تا پر شدن کامل ستون ، وارد آن شد. سپس ستون به مدت 2 ساعت به حالت سکون باقی ماند تا ژل به آرامی در انتهای آن متراکم گردید. پس از این مدت ،‌انتهای ستون باز شده و بافر ابتدا به آرامی (با بالا بردن سطح خروج بافر ) و به تدریج با سرعت جریان بیشتر از ستون خارج گشت. با پائین رفتن سطح ژل ، آنقدر ژل اضافه شد تا ستون از ژل فشرده شده پر شد. در این مرحله ، ستون به مدت دو روز توسط بافر C شسته شد تا علاوه بر فشردگی کامل ژل ، با بافر مذکور به تعادل رسید.
2-7-4- کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون :
مقدار mg 1 رنگ دکستران بلو در ml1 بافر C در حمام آب گرم حل شد. محلول آبی بدست آمده به مدت 3 دقیقه با دور rpm13000 میکروفیوژ شد. پمپ مکنده به لوله پلاستیکی انتهای ستون متصل شد و شدت مکش آن طوری تنظیم شد تا سرعت جریان بافر به ml/h3/5 رسید. محلول بدون رسوب دکستران بلو بر روی ستون برده شد. بلافاصله پس از اتمام رنگ ، ستون به مدت 3 ساعت توسط بافر C با غلظت mM100 نمک Nacl شسشته شد تا رنگ آبی (نشانه ) به ارتفاع  فوقانی طول ستون رسید. نمونه خشک شده با روش لیوفیلیزاسیون ،‌در حداکثر .....(ادامه دارد)ml2

PAGE در سیستم بافری ناپیوسته :
PAGE در اغلب موارد در سیستم بافری ناپیوسته (چندقسمتی ) انجام می گیرد. در سیستم بافری ناپیوسته، ‌بر خلاف سیستم بافری پیوسته ، ترکیب یونی و pH بافر در نمونه ، ژل و مخازن با یکدیگر تفاوت دارد. در این سیستم ژل شامل دو قسمت ژل فوقانی و ژل تحتانی است. این دو قسمت علاوه بر بافر ، از نظر اندازه منافذ ژل نیز متفاوت هستند.
مزیت سیستم بافری ناپیوسته در این است که کارایی الکتروفورز آنچنان متأثر از حجم نمونه نیست. در این سیستم میتوان حجم های بالایی از نمونه های رقیق پروتئین را بطور مطلوب به اجزای آن تفکیک نمود. دلیل آن این است که پروتئینها در طی حرکت در ژل فوقانی (ژل متراکم کننده ) به صورت لایه های بسیار نازکی درمی آیند و سپس در ژل تحتانی (ژل جداکننده) به اجزائ خود تفکیک میشوند.
این سیستم به سه نوع مختلف ، با pH بالا ، pH پائین و pH خنثی انجام میشود. سیستم بافری .....(ادامه دارد)

اثرات نمک بر روی حلالیت پروتئین ها:
در محلولهای آبی ، پروتئینها همچون مولکولهای دیگر، با پیوندهای کم و بیش قوی مولکولهای آب ، در یک ساختار منظم احاطه می شوند، آب بدلیل ثابت دی الکتریک بالا ،‌یک حلال عمومی برای پروتئینها محسوب می شود و چنین کمیتی با افزودن یونهایی همچون غلظتهای پائین Nacl به آب افزایش می یابد. (شکل 3) از این رو غلظت و نوع یونها بواسطة تغییر در ساختار و خواص آب ،‌ بر روی حلالیت پروتئینها تأثیر می گذارد. این اثرات اغلب با مراجعه به یونهای (Lyotrop Series) Hofmeister Series توضیح داده میشود.
اولین یونهای هر سری ، ساختار آب را می گسلد و حلالیت پروتئینها را کاهش می دهد (Salting out effect)  ولی یونهای آخر معمولاً حلالیت مولکولهای غیر قطبی را افزایش می دهند (Salting in effect)  این بدان معنی است که نمکهای مختلف ، با اثر ترکیبی آنیونها و کاتیونهای این سری ، بر روی حلالیت پروتئینها اثر می گذارند. (7)
1-1-2- جزء بندی پروتئینها با نمک آمونیوم سولفات :
عصارة خام حاصل از مرحله استخراج پروتئین ها ، به منظور کاربرد مستقیم بر روی ستونهای کروماتوگرافی مناسب نیست . بنابراین ، روشی لازم است تا علاوه بر آنکه عصاره را تغلیظ کند، بیشترین حجم پروتئینها را نیز برداشت نماید. نمک آمونیوم سولفات معمولترین نمک بکار رفته جهت رسوبدهی جزئی پروتئینها می باشد. این نمک با افزایش اثر آب گریزی در محلول ، موجب تجمع پروتئینها از طریق سطوح هیدروفوبیک و در نتیجه رسوب آنها می گردد.
در این روش، ابتدا پروتئینهای حجیم با یکدیگر رسوب می کنند و به این ترتیب بخشی از پروتئینهای اضافی حذف می شوند. سپس در مرحلة بعد رسوبگیری ، پروتئین مورد نظر می تواند از مادر آب بدست آمده ، رسوبگیری شود.
همانگونه که در (شکل 5) نشان داده شده است ، غلظت نمک آمونیوم سولفات مورد نیاز برای رسوبدهی ، بصورت درصد اشباع بیان میشود که وابسته به دماست. .....(ادامه دارد)

بخشی از فهرست مطالب مقاله ساخت محلول ها

ساخت محلولها :
1- محلولهای بافری:
2- محلولهای االکتروفورز:
2-1- محلول بافر B:
3-1- محلول بافر C:
1-2- محلول بافر تانک یا الکترود:
2-2-محلول بافر ژل متراکم کننده (ژل فوقانی):
3-2- محلول بافر ژل جدا کننده (ژل تحتانی):
4-2- محلول بافر نمونه (× 5):
6-2- محلول آمونیوم پرسولفات (APS):
1-3- محلول رنگامیزی کوماسی بلو G-250:
2-3- محلولهای رنگامیزی نقره :

 


دانلود با لینک مستقیم


دانلود مقاله ساخت محلول ها